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高效液相色譜柱如何選擇

? ? ? ? 高效液相色譜柱基于單分散硅膠微球,采用先進(jìn)的表面鍵合和修飾技術(shù),經(jīng)優(yōu)化的裝填工藝而成。獨(dú)特的封端工藝使硅羥基活性降到最低,適用于分離具有不同疏水性的化合物。下面小編說說高效液相色譜柱選擇原則。

? ? ? ? 高效液相色譜柱選擇之一看物理性質(zhì)。例如看柱長,內(nèi)徑,粒徑,孔徑,顆粒形狀等參數(shù)有沒有符合自己要求。

? ? ? ? 高效液相色譜柱選擇之二看化學(xué)性質(zhì)。硅膠基質(zhì):最通用的基質(zhì),強(qiáng)度大,化學(xué)修飾容易,但使用的pH值范圍有限(一般為2—8,特殊修飾的可以達(dá)到1—12)。聚合物基質(zhì):多為聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂,化學(xué)穩(wěn)定,應(yīng)用pH范圍寬,具有更強(qiáng)的疏水性,對蛋白質(zhì)等樣品分離效果較好;但強(qiáng)度較小,有機(jī)溶劑可能導(dǎo)致聚合物溶脹而受損,批次重復(fù)性較差,商品化色譜柱不多,一般價(jià)格較貴。載碳量:基質(zhì)表面鍵合相的比例,載碳量高,則保留增加,適合分析非極性化合物。鍵合相:鍵合試劑不同,對化合物的選擇性不同,一般長鏈的烷基鍵合相(C18 、C8)比短鏈的(C4、 C3)穩(wěn)定;非極性的鍵合相比極性的鍵合相(-NH2)穩(wěn)定。封端:用短鏈將裸露的硅羥基鍵合后封閉起來,以減少殘留的硅醇基,減輕待測組分與酸性硅羥基反應(yīng)而引起的色譜峰拖尾現(xiàn)象。尤其對于極性樣品而言,未封端處理的色譜柱分離效果較差。

高效液相色譜柱選擇

? ? ? ? 高效液相色譜柱選擇之三根據(jù)柱長及內(nèi)徑選擇。長度的選擇:柱越長,總柱效越高(n值越大),柱越長,分析時(shí)間也越長。實(shí)驗(yàn)室一半以上的工作采用250—300mm,這也是普遍柱長。

? ? ? ? 最后總結(jié)高效液相色譜柱選擇:目前市場上主要以反相色譜為主,約占80%的比例。分析大分子量化合物選擇大孔徑色譜柱;對于高pH值或者堿性化合物需要選擇高封端或者特殊封端的色譜柱,以改善峰形,延長色譜柱使用壽命等。更多有關(guān)液相色譜柱請看http://ivhdffv.cn/

新聞底欄


發(fā)布于: 2023-01-30
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