C18 液相色譜柱柱效測試是評估色譜柱分離性能的重要實驗。下面是 C18 液相色譜柱柱效測試的基本步驟：
1. 選擇適當?shù)牧鲃酉啵和ǔＪ褂梅聪嗌V法，選擇水和有機溶劑（如甲醇、乙腈等）的混合物作為流動相，根據(jù)待測樣品的性質(zhì)和分離要求，調(diào)整流動相的比例和 pH 值。
2. 制備樣品：將待測樣品溶解在流動相中，使用微量進樣器將樣品注入色譜柱。
3. 設置色譜條件：設置適當?shù)纳V條件，如流速、柱溫、檢測波長等。通常采用等度洗脫或梯度洗脫的方式，根據(jù)樣品的復雜程度和分離要求選擇合適的洗脫方式。
4. 記錄色譜圖：啟動液相色譜系統(tǒng)，記錄樣品的色譜圖。根據(jù)色譜圖中的峰形、峰高、峰面積等參數(shù)，評估色譜柱的分離效率和柱效。
5. 計算柱效：根據(jù)色譜圖中的峰寬和保留時間等參數(shù)，可以計算出色譜柱的理論塔板數(shù)（N）和理論塔板高度（H），從而評估色譜柱的柱效。通常要求色譜柱的理論塔板數(shù)至少達到 3000 以上，理論塔板高度在 1-3 毫米之間。
需要注意的是，C18 液相色譜柱柱效測試需要在一定的實驗條件下進行，包括流動相的選擇、樣品的制備、色譜條件的設置等。同時，測試結(jié)果也受到儀器的穩(wěn)定性、數(shù)據(jù)處理方法等因素的影響。因此，在進行 C18 液相色譜柱柱效測試時，需要嚴格控制實驗條件，并采用合適的數(shù)據(jù)處理方法，以獲得準確的測試結(jié)果。
發(fā)布于: 2023-08-28